鹿血清淀粉樣蛋白A試劑盒

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鹿血清淀粉樣蛋白A試劑盒內容及其配制

試劑盒成份（2-8℃保存）  96孔配置      48孔配置      配制

96/48人份酶標板  1塊板（96T）      半塊板（48T）     即用型

塑料膜板蓋    1塊 半塊       即用型

標準品：1600ng/L 1瓶（0.6ml）       1瓶（0.3ml）       按說明書進行稀稀

空白對照       1瓶（1.0ml）       1瓶（0.5ml）       即用型

標準品稀釋緩沖液       1瓶（5ml）   1瓶（2.5ml）       即用型

生物素標記的抗Dopamine抗體  1瓶（6ml）   1瓶（3.0ml）       即用型

親和鏈酶素-HRP   1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml）       即用型

洗滌緩沖液    1瓶（20ml） 1瓶（10ml） 按說明書進行稀釋

底物A    1瓶（6.0ml）       1瓶（3.0ml）       即用型

底物B    1瓶（6.0ml）       1瓶（3.0ml）       即用型

終止液    1瓶（6.0ml）       1瓶（3.0ml）       即用型

標本稀釋液    1瓶（12ml） 1瓶（6.0ml）       即用型

貯藏：2-8℃

包裝：盒裝，96T/盒、48T/盒

有效期：6個月

注意事項

1.　正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

　　2.　在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:

　?。?）　固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。

　?。?） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg／ml。

　?。?）　酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。

（4）　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

規格：96/48T，兩種規格，2~8℃保存，半年有效期。